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La chromatographie par adsorption permet d'isoler une molécule grâce à son affinité pour un ligand particulier. © angers, FAL 1.3, Wikimédia Commons
La chromatographiechromatographie est une méthode d'entraînement d'un échantillon dissout d'une phase mobilemobile vers un état stationnaire. Elle provoque une rétention des substances contenues dans l'échantillon : la dilution se déroule à une vitessevitesse fortement variable selon l'intensité des interactions entre les moléculesmolécules et la phase stationnaire. Mikhail Tswett est le premier, en 1906, à mettre en exergue ce principe par adsorptionadsorption (ou affinité). BotanisteBotaniste de son état, il utilise des colonnes d'adsorption dans le but de séparer les différents pigments que comporte une plante.
- Inventé en 1906 par Mikhail Semenovich TswettMikhail Semenovich Tswett
Principe de la chromatographie par adsorption
Il produit pour cela une succession d'analytes grâce à une phase mobile (gazeuse ou liquideliquide) sur une phase stationnaire fixe, c'est-à-dire un support composé d'un liquide ou d'un solidesolide. Plus les analytes ont une affinité avec la phase mobile, plus l'entraînement sera efficace. Tswett utilise un support macromoléculaire inerte sur lequel il greffegreffe un effecteur possédant une biocompatibilité pour une molécule spécifique de l'échantillon. La chromatographie permet donc de séparer différents éléments, de les purifier. Les effecteurs sont des ligandsligands qui permettent de fixer la molécule à isoler. Le ligand doit avoir une affinité avec ladite molécule et être fixé sur un support en résine. Ainsi, la réaction moléculaire se déclenche et la molécule s'isolera afin de se fixer sur le ligand, tandis que les autres éléments qui ne possèdent pas d'affinité seront éluées. Une désorptiondésorption peut ensuite être effectuée afin de récupérer la molécule isolée sur le ligand.
Utilisation de la chromatographie par adsorption
Cette technique est utilisée dans plusieurs domaines, notamment en immunologie, pour la technique de purification des anticorpsanticorps, ou en biochimiebiochimie, pour l'isolation des protéinesprotéines et des antigènesantigènes.
