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Annexe I
SOLUTION DE CHLORURE D'AMMONIUM
NH4Cl 0,15 M
NaHCO3 10 Mm
Ph = 7,4
SOLUTION DE HANKS'HEPES
Un flacon de Hanks et 0,35g de NaHCO3 pour un litre d'eau distilléeeau distillée
4,8g de HEPES (N-2-hydroxyethylpiperazine-N'-2-éthanesulfanic acide) pour 100 ml d'eau distillée
Pour la solution de Hanks'Hepes : 10 ml de HEPES et 100 ml de Hanks
Ph = 7,4
TAMPON DE LYSE POUR LA CHROMATOGRAPHIE
TRIS : 20 Mm
EGTA : 0,33 Mm
EDTA : 2 Mm
SucroseSucrose 0,33 Mm
Leupeptine : 0,5 µg/ml
PMSF : 30 µg/ml
β mercaptoéthanol : 50 Mm
Ph = 7,5
TAMPON POUR L'ETUDE DE LIAISON
TRIS : 20 Mm
Chlorure de potassium : 100 Mm
Chlorure de calcium : 0,5 Mm
Phosphatidyl sérinesérine : 50 µg/ml
DMSO : 0,17%
Ethanol : 0,2%
3H PDB : 30 Nm
Ph = 7,5
TAMPON DE LYSE POUR LE WESTERN BLOT
TRIS : 20 Mm
EGTA : 5 Mm
EDTA : 2 Mm
β mercaptoéthanol : 50 Mm
PMSF : 1 Mm
Leupeptine 330 µM
Antipaïne : 350 µM
Pepstatine A : 350 µM
Chymostatine : 40 µM
Aprotinine : 3,1 µM
Sucrose : 0,25 Mm
Ph = 7,5
SOLUTION ECHANTILLON
TRIS : 32 Mm
SDS : 71 Mm
Glycérol : 1,35 M
Bleu de bromophénol : 0,76 Mm
SOLUTION POUR WESTERN BLOT
TRIS : 50 Mm
Chlorure de sodium : 0,15 Mm
TWEEN 20 : 0,05%
Ph = 7,5
REACTIF A POUR LE DOSAGE DE LOWRY
1 ml de tartrate de sodium à 2%
1 ml de sulfate de cuivrecuivre à 1%
98 ml de carbonate de sodium dans la soudesoude 0,1 N
ANNEXE 2
TAMPON POUR LA LYSE DES LYMPHOCYTESLYMPHOCYTES ET MONOCYTESMONOCYTES
TRIS : 20 Mm
EDTA : 2 Mm
TritonTriton X100 : 0,5%
PMSF : 1 Mm
β-mercaptoéthanol : 50 Mm
Leupeptine : 330 µM
Pepstatine A : 350 µM
Ph = 7,5